掃描型分光光度計(jì)由光源產(chǎn)生復(fù)合光，進(jìn)入單色器后通過(guò)光柵或棱鏡將光線(xiàn)分解為不同波長(zhǎng)的單色光。這一過(guò)程確保了每一時(shí)刻僅有特定波長(zhǎng)的光照射到樣品上；當(dāng)單色光穿透盛放于透明樣品池中的被測(cè)物質(zhì)時(shí)，某些波段會(huì)被選擇性吸收，遵循朗伯-比爾定律(A=kbc)，即吸光度與濃度、液層厚度成正比關(guān)系；未被吸收的光抵達(dá)檢測(cè)器并轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，這些模擬量經(jīng)放大處理后由數(shù)據(jù)處理單元進(jìn)行模數(shù)轉(zhuǎn)換，生成光譜曲線(xiàn)；用戶(hù)設(shè)定波長(zhǎng)范圍后，系統(tǒng)自動(dòng)驅(qū)動(dòng)光柵連續(xù)旋轉(zhuǎn)實(shí)現(xiàn)全波段掃描，逐點(diǎn)記錄各波長(zhǎng)下的吸光度值，形成完整的吸收?qǐng)D譜。
 

　　掃描型分光光度計(jì)的測(cè)定步驟：
 

　　1.準(zhǔn)備工作
 

　　-連接電源與啟動(dòng)軟件：將儀器連接到穩(wěn)定的電源上，確保電壓匹配；同時(shí)檢查并啟動(dòng)配套的光譜分析軟件，確認(rèn)設(shè)備間的通信正常。
 

　　-環(huán)境適配：放置于干燥、堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)，避免強(qiáng)光直射，室內(nèi)溫度控制在15℃-35℃，相對(duì)濕度不超過(guò)80。
 

　　2.基線(xiàn)校準(zhǔn)
 

　　-使用無(wú)吸收的空白試樣覆蓋樣品池，調(diào)節(jié)光強(qiáng)至合適范圍后執(zhí)行“基線(xiàn)校準(zhǔn)”操作，系統(tǒng)會(huì)記錄當(dāng)前光強(qiáng)作為后續(xù)測(cè)量的基準(zhǔn)值。這一步可消除溶劑或比色皿本身的干擾信號(hào)。
 

　　3.樣品處理與裝載
 

　　-比色皿選擇與清潔：選用透明且無(wú)劃痕的專(zhuān)用比色皿，倒入待測(cè)溶液前需保證其表面潔凈、無(wú)氣泡。避免觸碰光學(xué)面以防污染或損傷；
 

　　-濃度控制：通過(guò)適當(dāng)稀釋使樣品濃度處于儀器線(xiàn)性響應(yīng)范圍內(nèi)，防止吸光度過(guò)高導(dǎo)致數(shù)據(jù)失真。
 

　　4.參數(shù)設(shè)置與掃描測(cè)試
 

　　-波長(zhǎng)選定：依據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?如蛋白質(zhì)選280nm、核酸選260nm)或預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定目標(biāo)波長(zhǎng)范圍；
 

　　-啟動(dòng)掃描：放置裝有樣品的比色皿后點(diǎn)擊“開(kāi)始測(cè)量”，儀器自動(dòng)完成全譜掃描并生成吸收光譜曲線(xiàn)。
 

　　5.數(shù)據(jù)處理與分析
 

　　-利用軟件提取特定波長(zhǎng)下的吸光度數(shù)值，繪制光譜圖，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)進(jìn)行定量計(jì)算，解讀峰位、強(qiáng)度等特征以推斷樣品成分及濃度變化。